نوع مقاله : پژوهشی- فارسی
نویسندگان
1 گروه بهداشت مواد غذایی واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
2 گروه بهداشت مواد غذایی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
3 مرکز تحقیقات تغذیه و محصولات ارگانیک، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
چکیده
کلیدواژهها
موضوعات
عنوان مقاله [English]
نویسندگان [English]
Dried fruits and spices are used in the diets of people around the world due to their extended shelf life and rich nutritional value. However, they are susceptible to contamination with aflatoxins at all stages of production and storage. Aflatoxin B1 is one of the most potent mycotoxins. The aim of the present study was to investigate the occurrence of aflatoxin B1 contamination in spices and dried fruits distributed in Sistan and Baluchestan using the ELISA method. The principle of this test relies on the antigen-antibody reaction. Microtiter wells coated with AFB1-specific antibody, both free and enzyme-conjugated AFB1 compete for binding to the specific antibody binding sites. In this study, 100 samples of dried fruits and spices were randomly collected from the market of Sistan and Baluchestan province and transferred to the food hygiene laboratory. To evaluate the data, an independent samples t-test, one-way ANOVA followed by Duncan’s multiple range test were used to compare the means and Chi-Square test was used to compare the frequency distributions. The results showed that 100% of the analyzed spice and dried fruit samples were contaminated with aflatoxin B1. The average contamination of aflatoxin B1 in dried fruits and spices was 1.68 and 1.83 (µg/kg), respectively. The results showed that none of the dried fruits and spices samples had contamination exceeding the Iranian and European standards (5 µg/kg). Overall, dried fruits and spices supplied in Sistan and Baluchestan do not pose a significant risk to consumer health.
کلیدواژهها [English]
مقدمه
مایکوتوکسینها متابولیتهای ثانویهای هستند که میتوانند توسط قارچهای رشتهای مانند گونههای آسپرژیلوس، آلترناریا و پنیسیلیوم در طول برداشت، پردازش، ذخیرهسازی یا جابهجایی در مواد غذایی ایجاد شوند. آنها میتوانند بهطور طبیعی در غذاها و محصولات کشاورزی ازجمله میوههای خشک، ادویهها، خشکبار و غلات وجود داشته باشند (1). بیش از 400 نوع مایکوتوکسین شناسایی شدهاند؛ با وجود این، مهمترین مایکوتوکسینها در مواد غذایی آفلاتوکسینهای B1، B2، G1، G2، M1، M2 و اکراتوکسین نوع A (OTA) هستند. آفلاتوکسینها توسط گونههای آسپرژیلوس ازجمله آسپرژیلوس پارازیتیکوس، آسپرژیلوس نومیوس و آسپرژیلوس فلاووس تولید میشوند (2). آلودگی با آفلاتوکسینها بهعنوان خطری فراگیر برای سلامتی انسانها و حیوانات در نظر گرفته میشود. سازمان خواروبار و کشاورزی ملل متحد اعلام کرده است در سراسر جهان، نزدیک به 25 درصد از محصولات غذایی با درجات گوناگون به سموم قارچی آلوده هستند (3).
در میان آفلاتوکسینهای اصلی، آفلاتوکسین B1 قویترین سم طبیعی بوده و توسط آژانس بینالمللی تحقیقات سرطان (IARC[1]) بهعنوان سرطانزای گروه 1 برای انسان طبقهبندی شده است؛ زیرا بهطور مستقیم سبب سرطان کبد میشود و میتواند علت اصلی سمیت حاد، سمیت مزمن، سرطانزایی، تراتوژنیسیتی و سمیت ژنی و سقط جنین باشد (4). روشهای نامناسب پس از برداشت مانند خشککردن کنترلنشده یا عدم تعادل سطح رطوبت مجاز، بیش از مقادیر بحرانی، رشد کپک و تولید مایکوتوکسینها را در طول ذخیرهسازی محصولات تسهیل میکند (5)؛ به این ترتیب، موقعیت جغرافیایی روی رشد آفلاتوکسینها تأثیرگذار است؛ بهگونهای که دمای بالا و رطوبت کم، مشوق اصلی تولید آفلاتوکسین است. محدوده دمای مناسب رشد گونههای آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین 20 تا 40 درجه سانتیگراد و بهینه رشد در 32 تا 37 درجه سانتیگراد و Aw[2] در محدوده 92/0 تا 95/0 است. آفلاتوکسینها در فاز رشد و ایستایی از منحنی رشد لگارتیمی در قارچها تولید میشوند (6).
میوههای خشک توسط مصرفکنندگان در سراسر جهان بهعنوان یک جایگزین پایدار برای میوههای تازه است، آنها منبع خوبی از فیبر غذایی، مواد معدنی، ویتامینها، ترکیبات فعال زیستی و آنتیاکسیدانها هستند که نقش محافظتی در سلامت انسان دارند. آنها همچنین دارای شاخص گلیسمی پایین تا متوسط هستند. ایالات متحده (15 درصد) و ترکیه (15 درصد) در پنج سال گذشته رهبران عرضه میوه خشک در جهان بودهاند و با هم 30 درصد از تولید میوه خشک جهان را به خود اختصاص دادهاند. ایران با 12 درصد در رتبه سوم تولید خشکبار قرار دارد و پس از آن عربستان سعودی (7 درصد) و چین (6 درصد) قرار دارند (7).
ادویهها محصولات خشکشدهای هستند که از قسمتهای مختلف گیاهان مانند ریشه، دانه، جوانه، برگ، گل و کلاله به دست میآیند و از زمانهای قدیم، در غذاها، داروها، مواد نگهدارنده و رنگ استفاده شدهاند. ادویهها بهدلیل داشتن طعم خوب، خواص معطر، اثرات نگهدارنده، ضدمیکروبی و آنتیاکسیدانی شناختهشده هستند. طعم منحصربهفرد ادویهها باعث شده است در مقادیر کم برای بهبود طعم یا عطر غذا استفاده شوند. آنها بهطور گسترده در مناطق گرمسیری، همچون هند و جنوبشرقی آسیا رشد میکنند (8). براساس گزارشها، تولید جهانی ادویهجات از 4/1 میلیون هکتار سطح برداشتشده در سال 2019، حدود 8/2 میلیون تن بوده است. آسیا سهم 86 درصدی از تولید ادویه دارد و پس از آن آفریقا 2/14 درصد و آمریکا 5/1 درصد در رتبههای بعدی قرار دارند (9). برخلاف میوههای خشک، ایران یکی از واردکنندگان و مصرفکنندگان اصلی ادویهها در سراسر جهان است. بیشتر ادویههای موجود در بازار ایران از خارج از کشور وارد میشوند و ممکن است آلوده به قارچ باشد؛ با این حال، آلودگی آفلاتوکسین در ادویهها و میوههای خشک از نگرانیهای جدی در سراسر جهان است که بر تجارت بینالمللی تأثیر میگذارد. در ایران سطح قابل قبول آفلاتوکسین B1 همراستا با استانداردهای سختگیرانة اروپا، 5 میکروگرم بر کیلوگرم است (10).
تشخیص و تعیین کمیت مایکوتوکسینها در ماتریکسهای غذایی مختلف با روشهای تحلیلی مختلفی مانند کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا با فلورسانس (HPLC-FLD[3]) یا اشعه ماوراءبنفش (HPLC-UV[4])، سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA[5]) و لایه نازک کروماتوگرافی (TLC) به دست میآید. همچنین، روشهای جدید دیگری مبتنی بر فناوریهای سریع برای تشخیص مایکوتوکسین، مانند روش ایمونواسی جریان جانبی (LFIA[6]) و پلاریزاسیون فلورسانس (FPIA[7]) پیشنهاد شدهاند (11).
از آنجایی که ادویهها عمدتاً از معدود کشورهای آسیایی با آبوهوای گرم و مرطوب تولید و وارد میشوند و با توجه به موقعیت جغرافیایی استان سیستان و بلوچستان، احتمال آلودگی به آفلاتوکسین B1 در طی فرایند حملونقل و نگهداری برا ادویهها و میوه خشک نسبتاً زیاد است؛ بنابراین، هدف از پژوهش حاضر بررسی وجود آفلاتوکسین B1 در ادویهها و میوه خشک عرضهشده در استان سیستان و بلوچستان به روش الایزا است.
مواد و روشها
نمونهگیری: در پژوهش حاضر درمجموع 100 نمونه میوه خشک و ادویه بهصورت تصادفی جمعآوری شدند. به این ترتیب، 50 نمونه میوه خشک بستهبندیشده شامل 10 نمونه از برگزردآلو، 10 نمونه برگهلو، 10 نمونه برگسیب، 10 نمونه برگموز و 10 نمونه برگکیوی و 50 نمونه ادویه پودرشدة بستهبندیشده شامل 10 نمونه دارچین، 10 نمونه فلفلسیاه، 10 نمونه زردچوبه، 10 نمونه آویشن و 10 نمونه سماق در مدت زمان 3 ماه از مهر تا دی 1403 از هایپرمارکتهای استان سیستان و بلوچستان که در بستههای پلیاتیلن نگهداری میشدند، نمونهگیری و به آزمایشگاه انتقال داده شدند. تمامی نمونهها تا زمان انجام آزمایش در شرایط خشک و خنک و در دمای یخچال نگهداری شدند. همه نمونهها، تولید داخل کشور بود.
آمادهسازی و عصارهگیری از نمونهها: مطابق چارچوب تعیینشده شرکت سازنده کیت الایزا (Europroxima Netherlands)، پس از همگنسازی نمونههای میوهخشک و ادویهجات، میزان مشخصی از نمونهها آسیاب شدند. سپس 2 گرم از نمونه آسیابشده با 3 میلیلیتر آبمقطر و 200 میکرولیتر آنزیم آلفاآمیلاز ترکیب شد و برای 20 دقیقه در دمای 25 درجه سانتیگراد گرماگذاری شد. در گام بعدی، 5 میلیلیتر متانول خالص به نمونهها اضافه و برای 2 دقیقه ورتکس شدند و در پایان، عصارة هرکدام از نمونهها به کمک فیلترهای کاغذی استخراج شد. 2 میلیمتر از هرکدام از عصارههای بهدستآمده با 2 میلیلیتر آب مقطر و 3 میلیلیتر دیکلرومتـان، مخلوط و بـه یـک لولـه سـانتریفیوژ انتقال داده و در دمای 15 درجه سانتیگراد و با 3500 دور در دقیقه برای 10 دقیقه سانتریفیوژ شدند. قسمت رویی مایع، دور ریختـه شد و قسمت پایین مایع، بـه یک لوله آزمـایش انتقال داده شد. برای تبخیر دیکلرومتان موجود در عصارهها، محتویـات لوله آزمایش به دستگاه روتاری اواپوریتور و در مجـاورت گـاز نیتروژن در درجه حرارت 50 درجـه سانتیگراد منتقـل شد. به رسوب باقیمانده در ته لوله آزمایش، 1 میلیلیتر متانول خالص و 5/1 میلیلیتر هپتال، اضافه و در دمای 10 درجه سـانتیگراد با 1500 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ شد. سپس 100 میکرولیتر از متانول با 400 میکرولیتر بافر رقیقکننده رقیق کیت به نسبت 1:4 رقیقسازی شد و در پایان 50 میکرولیتر از این محلول برای تست الایزا استفاده شد.
سنجش آفلاتوکسین به روش الایزا: هر کیت (Europroxima Netherlands) شامل مواد کافی برای انجام تعداد 96 اندازهگیری بوده است و حاوی مواد زیر بود: یک عدد میکروتیتر با تعداد 96 چاهک (در 12 ردیف 8 تایی) که با پادتن AFB1 پوشانیده شده بودند؛ شش عدد ویال حاوی محلول AFB1 (هریک به مقدار 3/1 میلیمتر) با غلظتهای برابر با 0 ppt (استاندارد 0)، 5 ppt،10 ppt، 20 ppt، 40 ppt و 80 ppt از AFB1 در بافر شیر؛ یک ویال محلول کونژوگه به میزان 3/1 میلیلیتر و حاوی محلول پراکسید کونژوگهشده با AFB1؛ یک ویال محلول سوبسترا (7 میلیلیتر) حاوی پراکسید اوره؛ یک ویال کروموژن (7 میلیلیتر) حاوی تترا متیل بنزیدین؛ یک ویال محلول متوقفکننده (14 میلیلیتر) حاوی اسید سولفوریک نرمال؛ یک ویال محلول بافر شماره 1 به میزان 20 میلیلیتر برای رقیقسازی محلول نمونه و استاندارد؛ یک ویال محلول بافر شماره 2 به میزان 12 میلیلیتر برای رقیقسازی محلول کونژوگه. در ضمن کیت AFB1 حاوی یک عدد محلول بافر شستوشو (نمک) نیز بود که برای آمادهسازی یک بافر فسفات (4/7pH=) به کار رفته و شامل توئین 20 با غلظت 05/0 درصد بود. اساس این آزمایش بر پایه واکنش پادگن – پادتن است. چاهکهای میکروتیتر با پادتن اختصاصی AFB1 پوشانیده شدهاند. ابتدا محلولهای استاندارد آفلاتوکسین به محلولهای نمونه، اضافه و بعد از یک مرحله شستوشو آنزیم کونژوگه افزوده میشود. AFB1 آزاد و کونژوگه برای باندشدن به جایگاههای اتصال پادتنهای آفلاتوکسین با یکدیگر رقابت میکنند. سپس طی یک مرحله شستوشو آنزیمهای کونژوگه باندنشده حذف میشوند. سوبسترای آنزیمی (پراکسید اوره) و کروموژن (تترا متیل بنزیدین) به چاهکها افزوده و گرمخانهگذاری میشوند. کونژوگه آنزیمی باندشده محلول کروموژن بدون رنگ را به محصولی با رنگ آبی تبدیل میکند. افزودن محلول متوقفکننده منجر به یک تغییر رنگ از آبی به زرد میشود. اندازهگیری به روش فوتومتری و در طول موج 450 نانومتر صورت میگیرد. میزان جذب نسبت معکوسی با غلظت آفلاتوکسین در نمونه دارد. حساسیت کیت سنجش آفلاتوکسین استفادهشده در این پژوهش (Europroxima Netherlands) ppb 05/0 بود. مقادیر برحسب میکروگرم بر کیلوگرم گزارش شدند. آزمون برای هر نمونه با دو بار تکرار انجام شد. براساس درصد جذب هر نمونه و انطباق با منحنی کالیبراسیون میزان آفلاتوکسین B1، در هر نمونه به دست آمد (12).
آنالیزهای آماری: از نرمافزار SPSS نسخه 23 برای محاسبات و ارزیابی دادهها و از آزمونهای آماری Indipendent sample t.test و ANOVA و تست Duncan برای مقایسه میانگینها و از آزمون کایدو (Chi-Square) برای مقایسه درصد فراوانیها استفاده شد و نرمافزار GraphPad Prism 9 برای رسم نمودارها به کار برده شد.
نتایج
نتایج آلودگی به آفلاتوکسین B1 در میوههای خشک: نتایج بررسی آلودگی میوههای خشک به آفلاتوکسین B1 در جدول 1 مشخص شده است. نتایج نشان دادند از مجموع 50 نمونه میوه خشک، 100 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند؛ اما هیچکدام از آلودگیها فراتر از استاندارد ملی ایران، مندرج در وبسایت اداره استاندارد و تحقیقات صنعتی ایران (5 میکروگرم بر کیلوگرم) نبود. به این ترتیب از 50 نمونه، 14 درصد کمتر از 1 میکروگرم بر کیلوگرم، 36 درصد در محدوده 1 تا 2 میکروگرم بر کیلوگرم، 34 درصد در محدوده 2 تا 4 میکروگرم بر کیلوگرم و 16 درصد در محدوده 4 تا 5 میکروگرم بر کیلوگرم به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند. بیشترین میزان آلودگی مربوط به برگکیوی 50 درصد بود.
جدول 1- توزیع فراوانی مطلق و نسبی رخداد آلودگی به آفلاتوکسین B1 (میکروگرم بر کیلوگرم) در میوههای خشک عرضهشده در سیستان و بلوچستان
Table 1- Absolute and relative frequency distribution of aflatoxin B1 contamination (micrograms/kg) in dried fruits supplied in Sistan and Baluchestan
|
نوع میوه خشک Type of Dried fruit |
تعداد نمونه Number of samples |
موارد آلوده Contamination |
محدوده آلودگی (g/kgµ) Contamination range (µg/kg) |
||||
|
>1 |
1-2 |
2-4 |
4-5 |
||||
|
برگزردآلو Dried Apricots |
10 |
n |
10 |
2 |
3 |
4 |
1 |
|
% |
100 |
20 |
30 |
40 |
10 |
||
|
برگهلو Dried Peach |
10 |
n |
10 |
0 |
4 |
3 |
3 |
|
% |
100 |
0 |
40 |
30 |
30 |
||
|
برگسیب Dried Apple |
10 |
n |
10 |
1 |
2 |
3 |
4 |
|
% |
100 |
10 |
20 |
30 |
40 |
||
|
برگموز Dried Banana |
10 |
n |
10 |
3 |
5 |
2 |
0 |
|
% |
100 |
30 |
50 |
20 |
0 |
||
|
برگکیوی Dried Kiwi |
10 |
n |
10 |
1 |
4 |
5 |
0 |
|
% |
100 |
10 |
40 |
50 |
0 |
||
|
جمع کل total |
50 |
n |
50 |
7 |
18 |
17 |
8 |
|
% |
100 |
bc14 |
a36 |
a34 |
bc16 |
||
n: تعداد نمونه. اعداد با حروف کوچک انگلیسی متفاوت، با 01/0 ˂ p اختلاف معنیدار آماری با یکدیگر دارند.
Numbers with different lowercase English letters are statistically significantly different from each other with p < 0.01.
نتایج آلودگی به آفلاتوکسین B1 در ادویهها: نتایج آلودگی به آفلاتوکسین B1 در ادویهها در جدول 2 آمدهاند. نتایج نشان دادند از مجموع 50 نمونه ادویه، 100 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند؛ اما هیچکدام از آلودگیها فراتر از استاندارد ملی ایران، مندرج در وبسایت اداره استاندارد و تحقیقات صنعتی ایران (5 میکروگرم بر کیلوگرم) نبود. به این ترتیب از 50 نمونه، 20 درصد کمتر از 1 میکروگرم بر کیلوگرم، 38 درصد در محدوده 1 تا 2 میکروگرم بر کیلوگرم، 36 درصد در محدوده 2 تا 4 میکروگرم بر کیلوگرم و 6 درصد در محدوده 4 تا 5 میکروگرم بر کیلوگرم به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند. بیشترین میزان آلودگی به آفلاتوکسین B1 مربوط به سماق با 50 درصد بود.
مقایسه میانگین آلودگی با استاندارد ایران: براساس نتایج بهدستآمده در جدول 3 و آزمون آماری Indipendent sample t.test تفاوت معنیداری 01/0˂p بین نمونههای میوه خشک و ادویهها در استان سیستان و بلوچستان با استاندارد ایران وجود داشت. نتایج بهدستآمده نشان دادند میانگین آلودگی به آفلاتوکسین B1 در میوه خشک 68/1 میکروگرم بر کیلوگرم و در ادویهها 83/1 میکروگرم بر کیلوگرم بود. همچنین ارتباط بین میانگین آلودگی در میوه خشک و ادویهها با احتمال 99 درصد معنیدار بود (جدول 3 و نمودار 1).
جدول 2- توزیع فراوانی مطلق و نسبی رخداد آلودگی به آفلاتوکسین B1 (میکروگرم بر کیلوگرم) در ادویهجات عرضهشده در سیستان و بلوچستان
Table 2- Absolute and relative frequency distribution of aflatoxin B1 contamination (micrograms/kg) in spices supplied in Sistan and Baluchestan
|
نوع ادویه Type of Spices |
تعداد نمونه Number of samples |
موارد آلوده Contamination |
محدوده آلودگی (g/kgµ) Contamination range (µg/kg) |
||||
|
>1 |
1-2 |
2-4 |
4-5 |
||||
|
دارچین Cinnamon |
10 |
n |
10 |
2 |
4 |
4 |
0 |
|
% |
100 |
20 |
40 |
40 |
0 |
||
|
فلفل سیاه Black pepper |
10 |
n |
10 |
2 |
5 |
3 |
0 |
|
% |
100 |
20 |
50 |
30 |
0 |
||
|
زردچوبه Turmeric |
10 |
n |
10 |
2 |
4 |
3 |
1 |
|
% |
100 |
20 |
40 |
30 |
10 |
||
|
آویشن Thyme |
10 |
n |
10 |
3 |
3 |
3 |
1 |
|
% |
100 |
30 |
30 |
30 |
10 |
||
|
سماق Sumac |
10 |
n |
10 |
1 |
3 |
5 |
1 |
|
% |
100 |
10 |
30 |
50 |
10 |
||
|
جمع کل total |
50 |
n |
50 |
10 |
19 |
18 |
3 |
|
% |
100 |
b20 |
a38 |
a36 |
c6 |
||
n: تعداد نمونه. اعداد با حروف کوچک انگلیسی متفاوت، با 01/0˂ pاختلاف معنیدار آماری با یکدیگر دارند.
Numbers with different lowercase English letters are statistically significantly different from each other with p < 0.01.
جدول 3- مقایسه آلودگی به آفلاتوکسین B1 (میکروگرم بر کیلوگرم) در میوه خشک و ادویههای عرضهشده در استان سیستان و بلوچستان با استاندارد ایران
Table 3- Comparison of aflatoxin B1 consumption (μg/kg) in dried fruits and spices supplied in Sistan and Baluchestan province with Iranian standards
|
نوع ماده غذایی Type of food |
میانگین آلودگی Average Contamination |
استاندارد ایران Standard of Iran |
سطح معنیداری SD |
|
میوه خشک Dried Fruit |
1/68±0/3 |
(µg/kg) 5 |
0/118ns |
|
ادویهها Spices |
1/83±0/6 |
(µg/kg) 5 |
0/121ns |
|
سطح معنیداری |
0/001** |
- |
- |
اعداد عبارتاند از میانگین ± انحراف معیار ns: تفاوت مقدار آفلاتوکسین نمونهها با استاندارد ایران معنیدار نیست **: تفاوت مقدار آفلاتوکسین نمونهها با استاندارد ایران با احتمال 99 درصد معنیدار است (p<0/05).
Numbrs are mean ± standard deviation. ns: The difference in the aflatoxin content of the samples with different Iranian standards is not significant. **: The difference in the aflatoxin content of the samples with the Iranian standard is significant with a probability of 99% (p<0.05).
نمودار 1- مقایسه آلودگی به آفلاتوکسین B1 (میکروگرم بر کیلوگرم) در میوه خشک و ادویههای عرضهشده در استان سیستان و بلوچستان با استاندارد ایران
Chart 1 - Comparison of aflatoxin B1 (μg/kg) in dried fruits and spices supplied in Sistan and Baluchestan province with Iranian standards
جدول 4- مقایسه میزان کل آلودگی آفلاتوکسین B1 در نمونههای ادویهجات و میوه خشک
Table 4- Comparison of total aflatoxin B1 contamination levels in spice and dried fruit samples
|
دامنه آلودگی Contamination range (µg/kg) |
میوه خشک (درصد) dried fruit (%) |
ادویهها (درصد) Spices (%) |
سطح معنیداری Significance level |
|
>1 |
7 (14%) |
10 (20%) |
0/009** |
|
1-2 |
18 (36%) |
18 (36%) |
0/001** |
|
2-4 |
17 (34%) |
18 (36%) |
0/001** |
|
4-5 |
8 (16%) |
3 (6%) |
0/208ns |
ns: تفاوت بین نمونههای مختلف معنیدار نیست *: تفاوت بین نمونهها با احتمال 95 درصد معنیدار است (05/0p<). **: تفاوت بین نمونهها با احتمال 99 درصد معنیدار است (p<0.01).
ns: The difference between different samples is not significant. *: The difference between samples is significant with a 95% probability (p<0.05). **: The difference between samples is significant with a 99% probability (p<0.01).
مقایسه میزان آلودگیها در میوه خشک و ادویهها: نتایج مقایسه میزان آلودگیها در میوه خشک و ادویهها در جدول 4 آورده شدهاند. هدف از این مقایسه تعیین ارتباط آماری بین میزان غلظت آفلاتوکسین در میوه خشک و ادویهجات است. به این ترتیب، بین غلظتهای کمتر از 1 (میکروگرم بر کیلوگرم) در میوه خشک و ادویهجات، بین غلظتهای 1 تا 2 (میکروگرم بر کیلوگرم) و غلظت 2 تا 4 (میکروگرم بر کیلوگرم)، با احتمال 99 درصد، ارتباط معنیدار وجود داشت؛ اما بین غلظتهای 4 تا 5 (میکروگرم بر کیلوگرم) در میوه خشک و ادویهجات ارتباط آماری معنیداری وجود نداشت.
بحث
میوههای خشک و ادویهها مستعد آلودگی قارچی هستند و عمدتاً توسط گونههای تولیدکنندة سم در قبل و بعد از برداشت آلوده میشوند. علاوه بر این، اکثر این محصولات بدون پردازش مناسب و در بیشتر موارد، بدون بستهبندی عرضه میشوند که با توجه به محیط مغذی که دارند، استعداد حضور و رشد گونههای مختلف مایکوتوکسین ازجمله آفلاتوکسین B1 را دارند (13)؛ در همین راستا، نتایج پژوهش حاضر نشان دادند 100 درصد نمونههای میوه خشک و ادویهها به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند که در میوهها و ادویهها میانگین غلظت آفلاتوکسین بهترتیب 68/1 و 83/1 میکروگرم بر کیلوگرم بود. چندین مطالعه در سراسر دنیا آلودگی آفلاتوکسین B1 را در ادویهها گزارش کردند. خزایی و همکاران (2017) در پژوهشی، 106 نمونه ادویه از 5 شهر ایران شامل کرمان، تبریز، تهران، ساری و بندرعباس را بهصورت تصادفی نمونهگیری کردند و گزارش دادند 5/16 درصد نمونهها به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (14). رضائی و همکاران (2014) در پژوهشی گزارش دادند از مجموع 200 نمونه ادویه نمونهگیریشده در شهرستان تهران، 6 درصد به آفلاتوکسین آلوده بودند (15). مطالعهای با هدف تعیین میزان آلودگی به آفلاتوکسین B1 در کرمان توسط دینی و همکاران (2012) گزارش شد که 100 درصد نمونهها به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (16). چراغی و همکاران (2007) در مطالعهای گزارش دادند از مجموع 3181 نمونه که در رفسنجان و کرمان نمونهگیری شد، 5/7 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (17). در تبریز رضوی و همکاران (2024) گزارش دادند از مجموع 75 نمونه، 25 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (18). در مطالعه سرهنگپور و همکاران (2010)، از مجموع 95 نمونه ادویهجات، 29 درصد به آفلاتوکسین آلوده بودند (19). در پژوهش Fazekas et al. (2005) در مجارستان، از مجموع 95 نمونه ادویهجات، 3/13 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (20). در لبنان نیز Daou et al. (2018) گزارش دادند از مجموع 312 نمونه، 9/15 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بوده است (21). Paterson et al. (2007) در پاکستان در پژوهشی با هدف تعیین میزان آفلاتوکسین B1 در 25 نمونه ادویهجات، گزارش دادند 62 درصد نمونهها به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (22). در فلسطین Barakat & Swaileh (2022) در پژوهشی گزارش دادند 23 درصد نمونههای ادویهجات به آفلاتوکسین آلوده بودند (23). در پاکستان Khan et al. (2014) آلودگی 28 درصدی میوههای خشک به آفلاتوکسین B1 را گزارش دادند (24). در مالزی Alsharif et al. (2019) نشان دادند از مجموع 120 نمونه میوه و ادویه خشک، 4/3 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (25). Ozkan et al. (2015) در ترکیه گزارش دادند 22/27 درصد از مجموع 180 نمونه ادویهجات به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (26). در پاکستان Iqbal et al. (2010) گزارش دادند 100 درصد از میوههای خشک نمونهگیریشده دارای آلودگی به آفلاتوکسین بودند (27). در برزیل Milhome et al. (2014) گزارش دادند 8/2 درصد (28) از نمونهها بیش از MTL[8] اروپا و ایران به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند که هیچکدام از مطالعات یادشده مطابقتی با یافتههای پژوهش حاضر ندارند. از مهمترین دلایل عدم مطابقت بین یافتههای سایر پژوهشگران با نتایج مطالعه حاضر میتوان به تفاوت در دورههای نمونهگیری مانند فصل نمونهگیری، روشهای اندازهگیری، شیوه آمادهسازی و وضعیت بستهبندی و عدم بستهبندی محصولات و نیز مهمترین عامل، دما و شرایط جغرافیایی محلهای نمونهگیری اشاره کرد.
Raza et al. (2022) در پاکستان، روی میزان بروز آفلاتوکسین در ادویههای موجود در کراچی گزارش دادند از مجموع 360 نمونه ادویه، 57 نمونه از ادویهها دارای آلودگی به آفلاتوکسین B1 بودند و بیشترین میزان آفلاتوکسین B1 در زردچوبه و کمترین آن در گشنیز بود. این پژوهشگران گزارش دادند آلودگی هیچکدام از ادویههای عرضهشده در کراچی فراتر از استاندارد نبود (29). Koutsias et al. (2021) روی آلودگی ادویههای عرضهشده در یونان به آفلاتوکسین B1 گزارش دادند از مجموع 29 نمونه، 20 نمونه (9/68 درصد) آلوده بودند (30) که با نتایج پژوهش حاضر مطابق است. نتایج پژوهش حاضر نیز نشان دادند آلودگی هیچکدام از ادویههای عرضهشده در سیستان و بلوچستان فراتر از استاندارد نبود. شرایط مختلف فرآوری و نگهداری میتواند باعث رشد کپک و ایجاد مایکوتوکسین شود. از مهمترین روشهای به حداقل رساندن رشد و تکثیر کپکها میتوان به روشهای تولید مناسب پس از برداشت گیاهان همچون تمیزکردن، خشککردن و بستهبندی اشاره کرد.
Sahin et al. (2024) در مطالعهای روی آلودگی به آفلاتوکسین در میوههای خشک عرضهشده در ترکیه گزارش دادند آفلاتوکسین در نمونههای میوه خشک 18/18 درصد فراتر از استاندارد اروپا بود (31). در همین راستا Mannani et al. (2023) در پژوهشی گزارش دادند از مجموع 210 نمونه میوه خشک نمونهگیریشده در مراکش، 1/99 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند (32). Naeem et al. (2022) در پژوهشی در پاکستان گزارش دادند از مجموع 60 نمونه میوه خشک، 86/7 درصد دارای آلودگی به آفلاتوکسین B1 بودند (33). در پاکستان Nazir et al. (2021) گزارش دادند از مجموع 50 نمونه میوهخشک، 10 درصد به آفلاتوکسین B1 آلوده بودند که 59 درصد فراتر از استاندارد بوده است (34). Ali et al. (2020) در پاکستان در پژوهشی با هدف تعیین سطح آفلاتوکسین B1 در میوههای خشک گزارش دادند 30/13 درصد نمونهها فراتر از استاندارد آلودگی داشتند (35). در هندوستان Patel et al. (2020) در پژوهشی گزارش دادند از مجموع 150 نمونه، 6/41 درصد فراتر از استاندارد آلودگی داشتند (36). Bakırcı et al. (2020) در ترکیه گزارش دادند از مجموع 1973 نمونه که در بازه زمانی 2014 تا 2018 نمونهگیری و آزمایش شده بود، 12/2 درصد فراتر از استاندارد آلودگی به آفلاتوکسین B1 را گزارش دادند (37) که با نتایج حاصل از یافتههای حاضر مطابقت ندارد. در این پژوهش هیچکدام از نمونهها فراتر از استاندارد ایران و اروپا نبودند.
Ugur et al. (2023) در ترکیه گزارش دادند هیچکدام از میوههای خشک نمونهگیریشده در ترکیه آلودگی فراتر از استاندارد اروپا نداشتند (38). در همین راستا Awan et al. (2021) (39) نیز در هیچکدام از نمونههای میوه خشک آلودگی فراتر از استاندارد گزارش ندادند. در پاکستان Asghar et al. (2017) میانگین آلودگی به آفلاتوکسین B1 در میوههای خشک را 85/0 (میکروگرم بر کیلوگرم) تعیین کرد (40). حشمتی و همکاران (2017)، در همدان میانگین آلودگی به آفلاتوکسین B1 را 56/2 (میکروگرم بر کیلوگرم) گزارش دادند (41). پژوهشی توسط Iqbal et al. (2017) روی آلودگی به آفلاتوکسین B1 در میوههای خشک صورت گرفت که گزارش دادند محدوده غلظت آفلاتوکسین 10/2 (میکروگرم بر کیلوگرم) بود (42). رضایی و همکاران (2014) در مطالعهای روی 60 نمونه میوه خشک نمونهگیریشده در شهرستان تهران گزارش دادند میانگین آلودگی 56/1 (میکروگرم بر کیلوگرم) بود (43). تمامی نتایج و گزارشهای یادشده با مطالعه حاضر همراستا هستند.
کشورهایی که آبوهوای معتدل، گرم و تا حدودی مرطوب دارند، در مقایسه با سایر مناطق، احتمال آلودگی بیشتری به انواع مایکوتوکسینها ازجمله آفلاتوکسین B1 دارند. غلظت آفلاتوکسین B1 در میوههای خشک از سالی به سال دیگر متفاوت است که بهشدت با نوسانات آبوهوایی مرتبط است. برای به حداقل رساندن تأثیر تغییرات آبوهوایی بر رشد مایکوتوکسین در میوههای خشک، یک رویکرد چندوجهی نیاز است که شامل استراتژیهای کاهش و سازگاری باشد؛ این شامل اجرای شرایط ذخیرهسازی دقیق، ازجمله کنترل دقیق دما، رطوبت، سطوح رطوبت، بستهبندی و مدیریت آفات است که همه در عین رعایت شیوههای درست تولید صورت میگیرد. از آنجایی که AFB1 توسط IARC بهعنوان سرطانزای انسانی گروه 1 طبقهبندی شده است، آلودگی در این غذاها تهدیدی جدی برای سلامت مصرفکنندگان بهویژه کودکان است. حذف یا نابودی کامل سموم کپکی در محصولات غذایی امکانپذیر نیست؛ بنابراین، مدیریت مؤثر و اتخاذ استراتژیهای کنترلی برای تضمین ایمنی مصرفکنندگان ضروری است. یک رویکرد عملی در این زمینه استفاده از سیستم مدیریت ایمنی مواد غذایی مبتنی بر HACCP یا تجزیه و تحلیل خطر و نقاط کنترل بحرانی در هنگام تهیه و تولید مواد اولیه و همچنین عملیات ذخیرهسازی، تولید و پس از تولید محصولات غذایی است. سیستم های مدیریت ایمنی مواد غذایی باید بهگونهای عمل کنند که مصرفکنندگان درنهایت در معرض کمترین سطوح آفلاتوکسین قرار گیرند. با توجه به نتایج بهدستآمده از پژوهش حاضر، هیچکدام از ادویهها و میوه خشک نمونهگیریشده در استان سیستان و بلوچستان آلودگی فراتر از استاندارد ایران و اروپا نداشتند که میتوان به تازگی محصولات و نگهداری در شرایط استاندارد اشاره کرد؛ بنابراین، مصرف ادویهجات و میوههای خشک عرضهشده در استان سیستان و بلوچستان نمیتواند مخاطرات نگرانکنندهای برای سلامت مصرفکننده به وجود بیاورد.
[1] International Agency for Research on Cancer
[2] Water Acticity
[3] High-performance liquid chromatography with fluorescence
[4] High-performance liquid chromatography with ultraviolet light
[5] Enzyme-linked immunosorbent assay
[6] Lateral Flow Immunoassay
[7] fluorescence polarization immunoassay
[8] Maximum Tolerance Limited