دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 14 53 2025 05 22 Isolation of Different Bacillus Species from the Soil of Yas Fatemi Forest Park and Investigation of Their Probiotic Properties جداسازی انواع باسیلوس‌ها از خاک پارک جنگلی یاس فاطمی و بررسی خواص پروبیوتیکی آنها 49 70 29117 10.22108/bjm.2024.143024.1617 FA صدیقه گوهری حیدری گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال، تهران، ایران عباس اخوان سپهی گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال، تهران، ایران صدیقه مهرابیان گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال‏، تهران، ایران Journal Article 2024 10 12 Soil, as one of the most important microbial ecosystems, serves as a habitat for the growth and reproduction of various microorganisms, including bacteria. Probiotics are live and beneficial microorganisms that, when consumed regularly, can improve overall health. Due to their immunological, functional and technological properties, probiotic bacteria are increasingly being proposed as health-promoting bacteria in various types of foods. In this study, samples were collected from six different points in the soil of Yas Fatemi Forest Park. After repeated culture for purification, initial identification of Bacillus species was carried out using catalase, citrate, sugar fermentation, motility, indole, lecithinase and gelatin hydrolysis tests. PCR was performed on the 16S rRNA gene for accurate strain identification. The phylogenetic tree of the superior strain was then constructed using Mega 7 software. Finally, the strains were tested for probiotic properties. In addition, the strains were evaluated for haemolytic activity, antimicrobial activity against Escherichia coli, Salmonella, Staphylococcus aureus and antibiotic resistance. At the end of the experiments, one strain (C2c) exhibited the best resistance characteristics under conditions simulating the gastrointestinal system. It was also resistance to antibiotics such as gentamicin, streptomycin, clindamycin, tetracycline, chloramphenicol, vancomycin and levofloxacin, while demonstrating significant antimicrobial activity against the pathogenic strains tested. Finally, this bacterium was identified as Bacillus subtilis CFR08 using biochemical identification methods and 16S rRNA sequencing. In this study, a strain of Bacillus subtilis was isolated from the soil of Yas Fatemi Forest Park and introduced as a bacterium with probiotic properties that can be used in industries that require probiotic bacteria. خاک به‌عنوان یکی از مهم‌ترین اکوسیستم‌های میکروبی محل رشد و تکثیر انواع مختلف میکروارگانیسم‌ها ازجمله باکتری‌ها است. پروبیوتیک‌ها میکروارگانیسم‌های زنده و مفید هستند که در صورت مصرف منظم، می‌توانند سلامت عمومی را بهبود بخشند. باکتری‌های پروبیوتیک، به‌دلیل ویژگی‌های ایمنی، عملکردی و تکنولوژیکی‌شان، به‌عنوان باکتری‌های سالم برای ارتقای سلامت در انواع مختلف غذا به‌طور فزاینده‌ای پیشنهاد شده‌اند. در این تحقیق از 6 نقطه مختلف از خاک پارک جنگلی یاس فاطمی نمونه‌برداری انجام شد که پس از کشت‌های متوالی برای خالص‌سازی، شناسایی اولیه با تست کاتالاز، سیترات، تخمیر قندها، حرکت، اندول، لیستیناز و هیدرولیز ژلاتین برای جداسازی باسیلوس‌ها انجام گرفت. به‌منظور شناسایی دقیق سویه، تست PCR روی ژن 16S rRNA انجام شد. سپس درخت فیلوژنتیکی سویه برتر توسط نرم‌افزار مگا 7 رسم شد؛ درنهایت، تست‌های مربوط به خواص پروبیوتیکی روی سویه‌ها انجام شدند. همچنین سویه‌ها ازنظر فعالیت همولیتیک و فعالیت ضدمیکروبی در برابر باکتری‌های Escherichia coli، Salmonella وStaphylococcus aureus و مقاومت به آنتی‌بیوتیک‌ها ارزیابی شدند. در پایان آزمایش، یک سویه (C2c) بهترین ویژگی‌های مقاومتی به شرایط مشابه دستگاه گوارش را نشان داد. همچنین، نسبت به آنتی‌بیوتیک‌های جنتامایسین، استرپتومایسین، کلیندامایسین، تتراسایکلین، کلرامفنیکل، وانکومایسین و لووفلوکساسین مقاومت کرد ؛درحالی‌که فعالیت ضدمیکروبی مناسبی علیه سویه‌های پاتوژن آزمایش‌شده نشان داد؛ درنهایت، این باکتری با به‌کارگیری روش‌های شناسایی بیوشیمیایی و توالی‌یابی 16S rRNA به‌عنوان Bacillus subtilis CFR08 شناسایی شد. در این مطالعه سویه Bacillus subtilis از خاک پارک جنگلی یاس فاطمی جداسازی شد و به‌عنوان باکتری دارای ویژگی‌های پروبیوتیک معرفی شد که می‌تواند در صنایع مصرف‌کنندة باکتری‌های پروبیوتیک استفاده شود.

https://bjm.ui.ac.ir/article_29117_d1eefa13c7661f1115900c850687bcb1.pdf