دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 7 27 2018 09 23 Changes in ahpF and tviA genes expression in Salmonella enterica PTCC 1230upon osmotic and oxidative stress using Real-Time PCR تغییر در بیان ژن‌های ‏ahpF‏ و ‏tviA‏ در ‏Salmonella enterica PTCC 1230‎‏ ناشی از تنش‌های ‏اسمزی و اکسیداتیو با روش ‏Real-Time PCR 13 23 22849 10.22108/bjm.2018.108142.1097 FA محمد فائزی قاسمی گروه زیست‌شناسی سلولی‌مولکولی، دانشکدۀ علوم پایه، ‌‌دانشگاه آزاد اسلامی واحد لاهیجان، ‌‌ایران حسین زحمتکش زکریایی گروه میکروبیولوژی ، دانشکدۀ علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد لاهیجان، ایران Journal Article 2017 11 22 Introduction:Salmonella is a member of the Enterobacteriaceaefamily causing infectious disease in human and animals. The diseases caused by this bacterium are typhoid, bacteremia, enterocolitis, salmonellosis which are a health problem worldwide. The aim of this study was to evaluate the changes in expression of ahpF and tviAgenes in Salmonella enterica PTCC 1230 exposed to osmotic and oxidative stresses. Materials and Methods: For osmotic stress, S.enterica PTCC 1230 was subjected to 6, 8, 10, 12, and 14% (W/V) NaCl concentrations and for the oxidative stress, H2O2at concentrations of 1200, 2400, 4800, 6000 and 7200 ppm were used. Change in expression of ahpF and tviA genes were quantified using Real-time PCR method. Results:Based on the obtained results, NaCl at concentrations of 14% and 10% and H2O2atconcentrations of 7200 (ppm) and 6000 (ppm) had maximum effects on the bacterial growth, respectively. In concentration of 7200 ppm, the expression of ahpFgene increased about 1.8 and 2.5-fold more thanH2O2at 6000 ppm concentration and reference gene (16S rRNA).Also, in 14% (W/V) sodium chloride concentration the expression of tviAgene increased about1.3 and 1.5 fold more than 10% and the reference gene (16S rRNA), respectively. Discussion and Conclusion:In this study, changes in expression level of ahpF and tviAgenes upon oxidation and osmotic stresses were studied in Salmonella entericaPTCC 1230. The overall results of this study showed that the expression level of both ahpF and tviAgenes were increased in stress condition and we recommend the study of the other genes incorporate in responses to environmental stresses. مقدمه: سالمونلا یکی از اعضای خانوادۀ انتروباکتریاسه است که باعث ایجاد بیماری‌های عفونی در انسان و حیوانات می‌شود. این باکتری بیماری‌هایی نظیر تب روده‌ای (تیفوئید)، باکتریمی، انتروکولیت و سالمونلوز ایجاد می‌کند که امروزه معضل بهداشتی در جهان محسوب می‌شوند. هدف بررسی و مطالعۀ حاضر، ارزیابی تغییرات ناشی از تنش‌های اسمزی و اکسیداتیو بر بیان ژن‌های tviAو ahpF در سالمونلا انتریکا PTCC 1230 است. مواد و روش‏‏ها: برای اعمال تنش اسمزی، باکتری در معرض غلظت‌های 6، 8، 10، 12 و 14 درصد وزنی/حجمی سدیم‌کلراید قرار گرفت و برای اعمال تنش اکسیداتیو از غلظت‌های 1200، 2400، 4800، 6000 و 7200 پی‌پی‌ام آب‌اکسیژنه استفاده شد. میزان کمّی تغییر بیان ژن‌های tviAو ahpFبا Real-Time PCR اندازه‌گیری شد. نتایج: غلظت‌های 14 و 10 درصد سدیم‌کلراید و غلظت‌های 7200 و 6000 پی‌پی‌ام آب‌اکسیژنه بیشترین اثر را روی رشد سالمونلا انتریکا PTCC 1230 داشتند. میزان بیان ژن ahpFدر غلظت 7200 پی‌پی‌ام آب‌اکسیژنه نسبت به شرایط 6000 پی‌پی‌ام و ژن مرجع (16S rRNA) به‌ترتیب 8/1 و 5/2 برابر افزایش یافت. همچنین بیان ژن tviA در غلظت 14 درصد سدیم‌کلراید نسبت به غلظت 10 درصد و ژن مرجع (16S rRNA) به‌ترتیب 3/1 و 5/1 برابر افزایش یافت. بحث و نتیجه‏گیری: در پژوهش حاضر، میزان تغییر بیان ژن‌های tviA و ahpF در شرایط تنش‌های اسمزی و اکسیداتیو در باکتری سالمونلا انتریکا PTCC 1230 با روش Real-Time PCR بررسی شد. با‌توجه‌به نتایج، مشخص شد بیان ژن‌هایahpF و tviA در شرایط تنش افزایش می‌یابد و بررسی پاسخ سایر ژن‌ها به تنش‌های محیطی پیشنهاد می‌شود.

https://bjm.ui.ac.ir/article_22849_e6c8ba6cc8b189436be4ce28ba007c84.pdf