دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 5 18 2016 08 22 Isolation and molecular identification of Lactobacillus brevis from traditional vinegar جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری لاکتوباسیلوس برویس از سرکه بومی 95 106 20386 10.22108/bjm.2016.20386 FA زینب ابراهیمی کارشناس ارشد زیست فناوری، دانشگاه اصفهان، ایران ابوالقاسم اسماعیلی دانشیار زیست‌شناسی مولکولی، دانشگاه اصفهان، ایران طوبی السادات احمدی کارشناس ارشد زیست فناوری، دانشگاه اصفهان، ایران حمید امامی دانشجوی دکترای میکروبیولوژی، دانشگاه اصفهان، ایران محمد ربانی دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه اصفهان، ایران 0000-0002-4043-9216 Journal Article 2016 10 04 Introduction: Vinegar is a popular condiment in the world that different materials and methods have been used to produce it. In Iran natural vinegar is also prepared mostly in a traditional way by using different fruits such as grapes and apples. Natural vinegar has beneficent properties and because of this, it is recommended to be used by traditional and Islamic medicine. Vinegar contains acetic acid bacteria, lactic acid bacteria and yeast. Acetic acid bacteria and yeasts are involved in the production of vinegar and lactic acid bacteria improve the flavor of vinegar. The aim of this study was isolation and identification of lactic acid bacteria especially Lactobacillus brevis from traditional vinegar. <br /> <br />Materials and methods: After collecting a few traditional vinegars, the vinegar samples cultured for isolation of lactic acid bacteria on MRS broth and agar media contained nystatin as an anti-yeast antibiotic. Then some microbiological tests including catalase, gram staining and fermentation of carbohydrates were performed. Then, they were cultured at different temperatures, pH and different concentrations of salts. Finally, three isolates bacteria with biochemical properties of Lactobacillus brevis were evaluated by16 srDNA gene amplification. <br /> <br />Results: Twelve lactobacilli were isolated from three vinegar samples. All isolated bacteria were catalase-negative and gram-positive. They could be able to grow at pH around 4.5 and 5.6, and at 2, 4 and 5.6% of salt concentrations. Most of the bacteria grew at 15oC, whereas one isolated grew at 45oC. Sequencing and Blast results showed that the three strains are Lactobacillus brevis. <br /> <br />Discussion and conclusion: Lactobacillus brevis and Lactobacillus plantrum were found in traditional vinegars. Although isolation of Lactobacillus plantrum from vinegar was reported previously, as far as we could determine, it is for the first time that we could isolate Lactobacillus brevis from vinegar. مقدمه: سرکه یک چاشنی پرمصرف در سراسر جهان است که از مواد اولیه و روش‌های متفاوت برای تولید آن استفاده می‌شود. در ایران نیز انواع سرکه‌های طبیعی با استفاده از میوه‌های مختلف مانند انگور و سیب، بیشتر به‌صورت خانگی تهیه می‌شود. سرکه طبیعی دارای خواص بسیار زیادی است و طب سنتی ایرانی اسلامی نیز مصرف آن را توصیه کرده است. سرکه حاوی باکتری‌های اسید استیک، اسید لاکتیک و مخمر است. باکتری‌های اسید استیک و مخمرها در تولید سرکه نقش دارند و باکتری‌های اسید لاکتیک باعث بهبود طعم آن می‌شوند. هدف این پژوهش جداسازی و تعیین هویت باکتری‌های اسید لاکتیک از سرکه سنتی به‌ویژه لاکتوباسیلوس برویس به‌منظور ارزیابی میزان تولید گاما آمینوبوتریک اسید (گابا) است‏. ‏‏<br /> <br /> مواد و روش ‏‏ها: نمونه‌های سرکه سنتی شامل یک نمونه سرکه سیب و دو نمونه سرکه انگور، در محیط کشت مخصوص باکتری‌های اسید لاکتیک (MRS) که به آن آنتی‌بیوتیک نیستاتین اضافه شد و کشت داده شد. با انجام تعدادی از آزمایش‌های تشخیصی از جمله آزمایش کاتالاز، و تخمیر برخی از کربوهیدرات‌ها، رشد در دما، pH و غلظت‌های متفاوت نمک، حضور لاکتوباسیل‌ها بررسی شد و درنهایت با تکثیر ژن s r DNA 16 و تعیین توالی، پنج گونه لاکتوباسیلوس شناسایی شدند. ‏‏<br /> <br /> نتایج: از سه نمونه سرکه سنتی، دوازده جدایه لاکتوباسیلوس جداسازی شد. همه باکتری‌های جداشده کاتالاز منفی و گرم مثبت بودند و در pHهای 5/4 و 5/6 و در غلظت‌های 2، 4 و 5/6درصد نمک رشد کردند. اغلب باکتری‌ها در دمای 15 درجه سانتی‏گراد رشد کردند. جدایه شماره 12 در دمای 45 درجه سانتی‏گراد نیز رشد کرد. آزمایش‌های بیوشیمیایی، حضور لاکتوباسیلوس پلانتارم و لاکتوباسیلوس برویس نمونه‌های مطالعه‌شده را نشان دادند. نتیجه تعیین توالی وجود سه جدایه لاکتوباسیلوس برویس را تأیید کرد. ‏<br /> <br /> بحث و نتیجه‏ گیری: لاکتوباسیلوس پلانتارم و لاکتوباسیلوس برویس در سرکه‌های بومی بررسی‌شده تشخیص داده شد. هرچند جداسازی لاکتوباسیلوس پلانتارم از سرکه قبلاً گزارش شده است، جداسازی لاکتوباسیلوس برویس از سرکه برای اولین بار گزارش می‌شود‏. ‏‏ https://bjm.ui.ac.ir/article_20386_154e9a5245ad3891770e72859197905a.pdf