دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 4 13 2015 05 22 Isolation and molecular identification of Clostridium bifermentans from anaerobic lagoons of wastewater treatment system جداسازی و شناسایی مولکولی کلستریدیوم بای فرمانتانس از برکه‏ های بی‏ هوازی تصفیه‏ خانه فاضلاب 129 138 19553 FA مجید مقبلی استادیار میکروبیولوژی، واحد دامغان، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران محمد رضا شفاعتی کارشناس ارشد میکروبیولوژی، واحد دامغان، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران Journal Article 2016 06 14 Introduction: Clostridiumbifermentansis a non pathogenbacteria and first isolated by Tissier and Martelli in 1992. This bacteria with a view to taxonomy has a close relationship with the Clostridiumsourdilli and is able to produce a wide range of metabolites such as acetic acid, lactic acid, formic acid, ethanol, butanol, acetone, carbon dioxide, nitrogen and specially hydrogen as clean source energy. The aim of this study was to isolate and molecular identify Clostridium bifermentans. Materials and methods: With aim to isolation of Clostridium bifermentans, the anaerobic wastewater samples from Mahdishahr sewage treatment laggons cultured on asynthetic complex medium and incubated anaerobically at room temperature. Chromosomal DNA isolated from grown bacteria and the 16s rRNA gene amplified with PCR. The PCR product was sequenced and purified. Results: Isolated bacteria from a macroscopic view on the complex media has white colonies and from a microscopic view was rod-shaped Gram-positive and had spore. of the 16s rRNA gene sequencing, isolated bacteria belong to the species Clostridium bifermentanswhich is called IRI2 strain and were recorded in gene bank with acception number KC525132. Discussion and conclusion: In this study a strain of Clostridium bifermentans was separated and identified with 16S rRNA sequencing method. With respect to the ability of this bacteria to produce various industrial products, this bacteria is to be used especially for production of hydrogen as biogas. مقدمه: کلستردیوم بای فرمانتانس (Clostridium bifermentans)یک باکتری غیر بیماری‏زاست که نخستین بار توسط تیسیر و مارتلی در سال 1992 جدا‏سازی شد. این باکتری به لحاظ تاکسونومی رابطه خیلی نزدیکی با کلستردیوم سوردیلی دارد و قادر به تولید طیف وسیعی از متابولیت‏ها مانند اسید استیک، اسید لاکتیک، اسید فرمیک، اتانول، بوتانول، استن، کربن‏دی‏اکسید، نیتروژن و به ویژه هیدروژن به عنوان یک منبع انرژی پاک‏ است‏. هدف از این پژوهش‏ جداسازی و شناسایی مولکولیکلستردیوم بای فرمانتانس است‏‏. مواد و روش‏‏ها: برای جداسازی کلستردیوم بای فرمانتانس، نمونه پساب از استخر بی‏هوازی تصفیه خانه فاضلاب مهدی‏شهر بر روی یک محیط سنتزیکمپلکس کشت داده شده و دردمای محیط وتحت شرایط بی‏هوازی قرار داده شد. از باکتری‏های ‏رشد کرده DNA کروموزومی جدا‏سازی و با کمک پرایمرهای اختصاصی، ژن 16S rRNA آن PCR شد‏. محصول PCR تخلیص و تعیین ترادف بازی شد. در نهایت، برای شناسایی دقیق باکتری جدا شده، ترادف بازی BLAST شد. نتایج: باکتری جدا شده از نظر ماکروسکوپی بر روی یک محیط کمپلکس کلونی‏ سفید ایجاد کرد و از نظر میکروسکوپی گرم مثبت میله‏ای شکل و اسپردار بود. نتیجه بررسی تعیین ترادف بازی ژن 16S rRNA نشان داد که باکتری جدا شده به گونهکلستریدیوم با ی فرمانتانس متعلق است‏ که در بانک ژن جهانی با نام سویه IRI2 و شماره KC525132 ثبت شد‏. بحث و نتیجه ‏گیری: در این پژوهش‏ سویه‏ای از کلستردیوم بای فرمانتانس جداسازی، شناسایی فیزیولوژیک و مقایسه مولکولی 16S rRNAشد. با توجه به توانایی این باکتری در تولید فرآورده‏های ‏مختلف صنعتی، از این باکتری می‏توان در تولید هیدروژن به عنوان یک بیوگاز استفاده کرد.

https://bjm.ui.ac.ir/article_19553_d5b209843a44fc83ec2ae44fb540b221.pdf