دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 3 12 2015 01 21 The Study of Synergistic Effects of n.butanolic Cyclamen coum Extract and Ciprofloxacin on inhibition of Pseudomonas aeruginosa biofilm formation بررسی اثرات سینرژیسمی عصاره بوتانلی گیاه Cyclamen coum و آنتی‏بیوتیک سیپروفلوکساسین بر مهار تشکیل بیوفیلم Pseudomonas aeruginosa 25 32 19548 FA احیاء عبدی عالی دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه الزهرا (س)، تهران، ایران مروارید شفیعی دانشجوی دکتری میکروبیولوژی، دانشگاه الزهرا (س)، تهران، ایران فرشته شاهچراغی استاد باکتریولوژی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران عذرا صبورا دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه الزهرا (س)، تهران، ایران طوبی غضنفری استاد ایمونولوژی، دانشگاه شاهد، تهران، ایران Journal Article 2016 06 14 Introduction: Infections caused by Pseudomonas aeruginosa biofilm are the major causes of death in patients with cystic fibrosis (CF). Some studies revealed that biofilms are resistant to several antibiotics because of their impermeable structures. In order to re-sensitize bacteria to different antibiotics, biofilm formation should be inhibited. In this research, evaluation of antibiofilm activity of n-butanolic Cyclamen coum extract as a medicinal plant from Myrsinaceae family, in combination with ciprofloxacin was carried out. Materials and methods : The biofilm formation ability by P. aeruginosaPAO1 and one clinically isolated P. aeruginosa (PA214) was confirmed by microtiter plate method. Extraction of the tubers of Cyclamen coum was done by fractionation method. The antibiofilm and antibacterial properties of n-butanolic C. coum extract (which includes saponin compounds) alone and in combination with ciprofloxacin by using microdilution and crystal violet methods were examined. The cytotoxicity effect of the n-butanolic extract on HT-29 cells was assayed by MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) test. Results: The biofilm formationability by P. aeruginosa strains was quantitatively confirmed. Saponin content of the n-butanolic C.coum extract was 156 µg/mL. The extract revealed antibacterial activity against the growth of planktonic P. aeruginosa strains. The combination of n-butanolic C.coum extract and ciprofloxacin significantly inhibited P.aeruginosa biofilm formation (ΣFBIC = 0.5). The n-butanolic C.coum extract showed insignificant cytotoxic effect against HT-29 human cancer cell line after 48 hours and 72 hours incubation. Discussion and conclusion: It can be concluded that n-butanolic C.coum extract in combination with ciprofloxacin significantly revealed antibiofilm activity against P. aeruginosa biofilm however, further clinical investigations are required. مقدمه: عفونت‏های ناشی از P. aeruginosa مولد بیوفیلم یکی از عوامل مهم مرگ و میر در بیماران مبتلا بهفیبروز سیستیک هستند. بر اساس نتایج بسیاری از پژوهش‏ها، بیوفیلم‏ها نسبت به بسیاری از آنتی‏بیوتیک‏ها به دلیل ساختار نفوذناپذیر مقاوم هستند. برای کاهش مقاومت باکتری‏ها به آنتی بیوتیک‏ها، باید تشکیل بیوفیلم مهار شود.در این مطالعه، اثرات ضدبیوفیلمی عصاره بوتانلی گیاه C. coum گیاه متعلق به خانواده Myrsinaceae در ترکیب با سیپروفلوکساسین علیه بیوفیلم P. aeruginosa بررسی شد . مواد و روش ‏‏ ها: ابتدا توانایی تشکیل بیوفیلم، در سویه P. aeruginosa PAO1 و سویه بالینی P. aeruginosa (PA214) توسط روش میکروتیترپلیت اثبات شد. عصاره‏گیری بخش توبر(ساقه زیرزمینی) گیاه C. coum توسط محلول‏‏های دی اتیل اتر، الکل اتانول و بوتانول انجام شد. فعالیت ضدمیکروبی و ضدبیوفیلمی عصاره بوتانلی گیاهC. coum (که دارای ترکیبات ساپونینی بود) به تنهایی و در ترکیب باآنتی‏بیوتیک سیپروفلوکساسین توسط روش‏های microdilution و کریستال ویوله بررسی شد. تاثیرات سایتوتوکسیسیته عصاره بوتانلی گیاه C. coum بر روی سلول‏های HT-29 توسط روش MTT بررسی شد . نتایج: توانایی تشکیل بیوفیلم توسط سویه‏‏های P. aeruginosa به شکل کمی اثبات شد. میزان ساپونین عصاره بوتانلی گیاه C. coum ، 156 میکروگرم بر میلی‏لیتر بود. عصاره بوتانلی گیاه C. coum تاثیرات ضدمیکروبی علیه سویه‏‏های آزاد-زی P. aeruginosa نشان داد. ترکیب عصاره بوتانلی گیاه C. coum و آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین به‏طور معنی‏ داری سبب مهار تشکیل بیوفیلم شد (ΣFBIC ≤ 0.5) . عصاره بوتانلی گیاه C. coum فاقد اثرات سایتوتوکسیک برروی سلول‏‏های HT-29 بود . بحث و نتیجه ‏ گیری: ترکیب عصاره بوتانلی گیاه C. coum و آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین فعالیت ضدبیوفیلمی معنی‏داری علیه P. aeruginosa نشان داد، اما هنوز مستلزم تحقیقات بالینی بیشتری است.

https://bjm.ui.ac.ir/article_19548_775fcc4f71ff560662887c2077652189.pdf