دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 3 10 2014 06 22 Isolation and identification of oil sludge degrading bacteria from production tank Number 9 Masjed Soleiman جداسازی و شناسایی باکتری‏های تجزیه کننده پسماند نفت از مخزن بهره‏برداری شماره 9 مسجد سلیمان 13 26 19524 FA یلدا شینی دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، ایران حسین معتمدی دانشیار گروه میکروبیولوژی، دانشگاه شهید چمران اهواز، ایران احمدعلی پوربابایی استادیار گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، ایران Journal Article 2016 06 14   Introduction: “Bioremediation” is one of the most effective methods to remove petroleum contaminants. The aim of the present study is to isolate the indigenous bacteria from the waste petroleum in the Masjed Soleiman No. 9 production tank and to examine the effect of their application on the elimination of petroleum heavy chain hydrocarbons and converting them into light compounds .   Materials and methods: Two percent of petroleum sludge was inoculated to the mineral basal medium and after proliferation of its indigenous bacteria, they were inoculated into the mixture of oil sludge and sand at level of 5%, and the amount of total hydrocarbons and residual oil were measured and compared. The isolates were identified based on biochemical tests and 16S rRNA gene sequencing. Optimization of nitrogen and phosphate sources was done based on growth curves of selected isolates. Gas chromatography was used to determine degradation of sludge hydrocarbons.   Results: In this study, 10 bacterial isolates were isolated from petroleum sludge . Measurement of petroleum total hydrocarbons, using Soxhlet-extraction method, showed that two isolates named MIS1 and MIS2 are able to decompose oil sludge hydrocarbons within 7 days, with the yields of 62% and 72%, respectively. Furthermore, the two isolates reach the end of the logarithmic phase at 48 and 120 hrs, respectively. The best source of nitrogen and phosphate for both isolates was ammonium nitrate and potassium di ­hydrogen phosphate, respectively. The isolates were identified as Arthrobacter aurescens and Pseudomonas aeruginosa , respectively. In gas chromatography analysis it was revealed that Pseudomonas aeruginosa was more potent in degradation of heavy chain hydrocarbons and their conversion to light chain compounds.   Discussion and conclusion: Resident bacteria are present in the oil sludge and are able to degrade the heavy petroleum compounds and convert them into light compounds. These bacteria are effective in the reduction of environmental pollution and production of low molecular weight hydrocarbons.   مقدمه : زیست پالایی یکی از روش‏های موثر برای حذف آلاینده‏های نفتی است. هدف از مطالعه حاضر جداسازی باکتری‏‏های بومی پسماند نفت مخزن بهره بردای شماره 9 مسجدسلیمان و بررسی تأثیر استفاده از آن‏ها در کاهش ترکیبات سنگین نفت و تبدیل آن‏ها به ترکیبات سبک است ‏‏.   مواد و روش‏‏ها: به منظور تکثیر باکتری‏های موجود در پسماند نفت، 2درصد پسماند نفتی به محیط پایه معدنی تلقیح و پس از گرماگذاری و رشد، جهت سنجش تجزیه پسماند به میزان 5 درصد به محیط حاوی مخلوط پسماند و نفت تلقیح شد. سپس، در زمان های مختلف میزان هیدروکربن‏های باقیمانده نفت اندازه‏گیری شدند. شناسایی باکتری‏ها با استفاده از آزمون‏های بیوشیمیایی و تعیین توالی ژن 16S rRNA انجام شد. منحنی رشد جدایه‏های منتخب رسم و بهینه‏سازی منابع نیتروژن و فسفات برای آن‏ها انجام شد. از کروماتوگرافی گازی برای تعیین میزان تجزیه هیدروکربن‏های پسماند استفاده شد .   نتایج: در این تحقیق 10 جدایه باکتریایی از پسماند نفت جداسازی شد. اندازه­گیری هیدروکربن­های کلی نفت با روش Soxhlet - extraction نشان داد که دو جدایه MIS1 و MIS2 تجزیه‏کنندگی نفت را در طی 7 روز، به ترتیب با بازدهی 62 و 72 درصد انجام می‏دهند. به‏علاوه این دو جدایه به ترتیب در ساعت 48 و120 به انتهای فاز لگاریتمی می‏رسند. بهترین منبع نیتروژن و فسفات برای هر دو جدایه نیز، به ترتیب نیترات آمونیوم و پتاسیم دی هیدروژن فسفات بود. این جدایه‏ها در آزمون­های تشخیصی به ترتیب Arthrobacteraurescens و Pseudomonasaeruginosa تشخیص داده شدند. تحلیل‏ کروماتوگرافی گازی جدایه‏ها نشان داد سودوموناس بیش‏ترین میزان تجزیه ترکیبات سنگین و تبدیل آن‏ها به ترکیبات سبک را انجام می­دهد .   بحث و نتیجه‏گیری: باکتری‏های ساکن پسماند نفت قادر به استفاده ار هیدروکربن‏های موجود در پسماند به عنوان منبع کربن و انرژی هستند و با متابولیزه کردن این ترکیبات، موجب کاهش آن‏ها در محیط زیست از طریق شکستن آن‏ها و تبدیل به ترکیبات سبک و یا فرار می‏شوند . https://bjm.ui.ac.ir/article_19524_53bb52e55796a051673b9f27a3ae7333.pdf