دانشگاه اصفهان زیست شناسی میکروبی 3060-7647 2 8 2014 01 21 Study on some characteristics of Staphylococci isolated from sheep sub clinical mastitis milk in Shahrekord, Iran مطالعه برخی خصوصیات استافیلوکوکسی‏ها‏ی جدا شده از شیر میش‏ها‏ی مبتلا به ورم پستان تحت بالینی در شهرکرد، ایران 57 62 19506 FA عزیزاله ابراهیمی استادیار میکروبیولوژی، دانشگاه شهرکرد، ایران فاطمه سلیمانی دکتری حرفه ای دامپزشکی، دانشگاه شهرکرد، ایران آذر معتمدی دکتری حرفه ای دامپزشکی، دانشگاه شهرکرد، ایران ناصر شمس دانشیار مامایی و بیماری‏های تولید مثل، دانشگاه شهرکرد، ایران شراره لطفعلیان دانشجوی کارشناسی ارشد باکتری شناسی، دانشگاه شهرکرد، ایران Journal Article 2016 06 14   Introduction : Staphylococci release a large number of enzymes. Some of these, such as coagulase, beta lactamase, hemolysins and biofilms are considered indices of pathogenicity. The aim of the current study was based on the isolation and identification of Staphylococcus aureus and coagulase negative Staphylococci (CNS) strains from sheep sub clinical mastitis and examining their biofilm, beta lactamase, hemolysins production and antibiotic resistance pattern.   Materials and method s: 55 Staphylococci strains were isolated from seventy cases of sheep subclinical mastitis. Thirty three were determined as Staphylococcus aureus (60%) and 22 (40%) as CNS. The hemolytic activity was evaluated by plating Staphylococci strains on 5% bovine blood agar. The biofilm assay was performed by using micro titer plates . Beta Lactamase production was detected by test tube iodometric technique and susceptibility to antimicrobial agents was determined for isolated strains by the disk diffusion method.   Results : Twenty six (78.8%) S. aureus strains were biofilm producers. For CNS (59.9%) strains were positive in biofilm production. Two isolates (6.06%), of S. aureus were α, the same number β and 6 (18.2%) isolates were ∂ hemolysin producers. Six isolates of CNS (27.27%) were α and ten (45.45%) ∂ hemolysin producers . Sixteen S. aureus (48.5%) and five CNS (22.72%) isolates were positive in beta lactamase production. The isolated Staphylococci show a low sensitivity pattern to methicillin and streptomycin.   Discussion and conclusion : A high percentage of strains make α toxin that play a role in S. aureus biofilm formation. Twenty one out of 33 (63.63%) isolated Staphylococci were biofilm producers that can have deleterious effects because biofilm formation is thought to play an important role in the survival of virulent strains of Staphylococci. Sixteen out of 33 (48.5%) isolated S. aureus were positive in beta lactamase test, Excluding resistant to methicillin, all of these isolates show a marked sensitivities to other examined beta lactam drugs. High percentage of hemolysins, biofilm and beta lactamase production by isolated Staphylococci, suggest an important role of these virulence factors in the pathogenesis of isolated Staphylococci from mastitis sheep milk samples.     مقدمه: استافیلوکوکسی‏ها‏ آنزیم‏ها‏ی فراوانی در محیط آزاد می‏کنند که برخی از آن‏ها نظیر کوآگولاز، بتا لاکتاماز، همولایزین‏ها‏ و بیوفیلم‏ها‏ جزء اندیس‏ها‏ی بیماری ‏ زایی این باکتری‏ها‏ محسوب می ‏ شوند. هدف مطالعه حاضر، جدا‏سازی و تشخیص استافیلوکوکوس اورئوس و استافیلوکوکوس‏ها‏ی کوآگولاز منفی از گوسفندان مبتلا به ورم پستان تحت بالینی و آزمایش تولید بیوفیلم، بتالاکتاماز و همولایزین‏ها‏ و نیز الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی آن‏ها می‏باشد .   مواد و روش ‏‏ ها: در این مطلعه، 55 جدایه استافیلوکوکسی به‏‏دست آمد که 33 مورد آن (60 درصد) استافیلوکوکوس اورئوس و 22 مورد (40 درصد) استافیلوکوکسی کوآگولاز منفی تشخیص داده شد. فعالیت همولایتیک جدایه‏ها‏ با کشت آن‏ها بر سطح محیط ژلوز خون‏دار (تهیه شده با خون گاو) ارزیابی شد. تولید بیوفیلم با روش پلیت میکروتیتر ارزیابی و تولید بتا لاکتاماز با روش یودومتریک و حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفیوژن تعیین شد .   نتایج: 26 مورد (8/78) از جدایه‏ها‏ی استافیلوکوکوس اورئوس و 9/59 درصد از استافیلوکوکسی‏ها‏ی کوآگولاز منفی قادر به تولید بیوفیلم بودند. از جدایه‏ها‏ی استافیلوکوکوس اورئوس دو مورد همولیز آلفا (06/6 درصد)، دو مورد همولیز بتا و 6 مورد (2/18 درصد) همولیز دلتا تولید کردند. از استافیلوکوکسی‏ها‏ی کوآگولاز منفی 6 جدایه (27/27) همولیز آلفا و 10 جدایه (45/45 درصد) همولیز دلتا تولید کردند. در جدایه‏ها‏ی استافیلوکوکوس اورئوس 26 مورد (8/78 درصد) و استافیلوکوکسی‏ها‏ی کوآگولاز منفی پنج مورد (72/22 درصد) تولید آنزیم بتا لاکتاماز کردند. استافیلو کوکسی‏ها‏ی جدا شده حساسیت پایینی نسبت به متی سیلین و استرپتومایسین نشان دادند .   بحث و نتیجه ‏ گیری: درصد بالایی از جدایه‏ها‏ همولایزین آلفا تولید کردند که نقش مهمی در تولید بیوفیلم توسط استافیلوکوکوس اورئوس ایفا می نماید. 21 جدایه از 33 جدایه (63/63 درصد) استافیلوکوکوس‏ها‏ قادر به تولید بیوفیلم بودند که می‏تواند اثرات بدی داشته باشد. چون به نظر می رسد تولید بیوفیلم نقش مهمی در ابقا این باکتری داشته باشد. 16 جدایه از 33 جدایه (5/48 درصد) استافیلوکوکوس اورئوس در آزمایش تولید بتا لاکتاماز مثبت شدند. صرف نظر مقاومت به متی سیلین تمامی این جدایه‏ها‏ حساسیت قابل توجهی به آنتی بیوتیک ‏ها‏ی بتا لاکتام مورد آزمایش نشان دادند. درصد بالای تولید همولیزین، بیوفیلم و بتا لاکتاماز بیانگر نقش مهم این عوامل حدت در بیماری‏زایی استافیلوکوکسی‏ها‏ی جدا شده از نمونه شیر‏ها‏ی ورم پستان میش است . https://bjm.ui.ac.ir/article_19506_57bdad07f3d1e1766dc5caed9e2b753e.pdf