زینب سادات متشرعی؛ هاجر محمودی؛ پرویز اولیاء؛ حسن سلیمی
دوره 3، شماره 11 ، پاییز 1393، ، صفحه 37-46
چکیده
مقدمه: باکتریهای ریزوسفری محرک رشد گیاه که حاوی آنزیمِ (1- آمینـو سـیکلوپروپان -1- کربوکـسیلیک اسید) دآمیناز هستند، میتوانند برای بهبود رشد گیاهان بهویژه تحت شرایط تنش محیطی کاربرد داشته باشند. ...
بیشتر
مقدمه: باکتریهای ریزوسفری محرک رشد گیاه که حاوی آنزیمِ (1- آمینـو سـیکلوپروپان -1- کربوکـسیلیک اسید) دآمیناز هستند، میتوانند برای بهبود رشد گیاهان بهویژه تحت شرایط تنش محیطی کاربرد داشته باشند. این تحقیق با هدف بررسی توان سویه‌های بومی در تولید آنزیم ACCدآمیناز انجام گرفت.
مواد و روشها: از 8 نمونه خاک ریزوسفری و غیرریزوسفری، کشت به روش تهیه رقت‌های متوالی در محیطهای اختصاصی تهیه شد. به منظور آزمون نیمه کمی توان تولید ACCدآمیناز در جدایههای بهدست آمده، قطر کلونیها در پلیت به روش لکهگذاری پس از مایهکوبی و گرماگذاری در روزهای 1، 2 و 5 ارزیابی شد. توانایی تولید آنزیم ACCدآمیناز در سویه‌های منتخب، با استفاده از تراکم نوری رشد در طول موج 504 نانومتر در محیطهای مناسب ارزیابی شد. میزان فعالیت آنزیمACC دآمیناز با تعیین غلظت آلفا کتوبوتیرات آزاد شده برای سویه‌های منتخب انجام گرفت. آزمون‌های بیوشیمیایی و میکروبیولوژیک برای شناسایی تمامی سویه‌های منتخب انجام شد. در نهایت، شناسایی سویه منتخب که دارای بیشترین میزان فعالیت آنزیم بود، با تکثیر و تعیین توالی ژن 16S rRNAانجام گرفت.
نتایج: تعداد 445 جدایه، خالص شد و با آزمون نیمه کمی توان تولید ACCدآمیناز، تعداد 17سویه انتخاب شد. بر اساس توانایی جدایهها در تولید آنزیم، 9 سویه انتخاب شد و نتایج شناسایی مقدماتی نشان داد که سویه‌های منتخب به جنسهای Pseudomonas، Bacillusو گروهActinomycetesمتعلق هستند. بررسی میزان فعالیت آنزیم نشان داد که سویه 12 Kot با بیشترین مقدار فعالیت آنزیم به میزان 4369/826 نانومول آلفا کتوبوتیرات/میلیگرم پروتئین/ ساعت، در گروه سودوموناس های فلورسنت و به گونه Pseudomonas brassicacearum متعلق هستند.
بحث و نتیجهگیری: با توجه به فعالیت در خور توجه آنزیم ACCدآمیناز در این سویه بومی بهدست آمده (4369/826 نانومول آلفا کتوبوتیرات/میلیگرم پروتئین/ ساعت) در مقایسه با سویه‌های مشابه، میتوان با بهینهسازی شرایط تولید آنزیم و تهیه فرمولاسیون مایه تلقیح بر پایه باکتری محرک رشد گیاه به منظور استفاده در مزرعه بهره گرفت.
